羊肚菌菌絲生長的適溫度為22~25℃，生長速度很快，可達1~2厘米/天，但是菌絲較細弱。一般將羊肚菌菌種置于18~22℃條件下培養，菌絲粗壯、生長也較快，稱為為羊肚菌的協調適溫度。
羊肚菌的原種、栽培種在培養前期，溫度一般控制在20~22℃，菌絲體生長速度較快。培養后期，溫度控制在18~20℃，菌絲體生長速度相對變慢，但是菌絲體更加粗壯，菌核數量也會更多。
羊肚菌的子實體生長的適溫度在14~18℃，溫度穩定超過8℃達到3天，菌絲就很容易分化形成羊肚菌原基。日平均氣溫在15℃以下，
子實體生長速度慢，20~25天才能采收。日均氣溫在15℃以上，子實體生長速度較快，10~15天可采收。
