本標(biāo)準(zhǔn)適用于商品糧食、油料淀粉含量的測(cè)定。
1　儀器和用具
1.1　古氏坩堝：25ml;
1.2　抽濾瓶：500ml;
1.3　真空泵或水泵；
1.4　滴定管：25ml;
1.5　錐形瓶：100ml、250ml、500ml;
1.6　移液管：20ml;
1.7　容量瓶：100ml、250ml、500ml;
1.8　回流冷凝管；
1.9　電爐；
1.10　燒瓶：150ml;
1.11　漏斗：6cm;
1.12　研缽、溫度計(jì)、顯微鏡等。
2　試劑
2.1 0.5％淀粉酶溶液或麥芽汁：取大麥粒加水濕潤浸泡12h，在搪瓷盤內(nèi)平鋪約1cm厚，使其發(fā)芽數(shù)日。待幼芽長(zhǎng)約1cm時(shí)，取發(fā)芽粒50g，磨碎，加水400ml，在常溫下浸漬3h，過濾備用(保存時(shí)加氯仿或甲苯數(shù)滴，防止生霉)；
2.2 碘溶液：稱碘化鉀3.6g, 溶于20ml水中，加碘1.3g，溶解后再加水至100ml；
2.3 0.1N高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液；
2.4 1N氫氧化鈉溶液：取氫氧化鈉4g加水溶解至100ml;
2.5　硫酸鐵溶液：取硫酸鐵50g，加水200ml溶解后，饅慢加入硫酸100ml，冷后加水至1000ml;
2.6 3N鹽酸: 取鹽酸25ml，加水至100ml;
2.7 6N鹽酸：取鹽酸100ml，加水至200ml;
2.8 20％氫氧化鈉溶液；
2.9　甲基紅指示液：0.1％甲基紅乙醇溶液；
2.10　費(fèi)林氏溶液：
2.10.1 堿性酒石酸銅甲液：取硫酸銅結(jié)晶34.69g，加適量水溶解，加硫酸0.5ml，再加水至500ml，用精制石棉過濾；
2.10.2 堿性酒石酸銅乙液：取酒石酸鉀鈉173g與氫氧化鈉50g，加適量水溶解，稀釋至500ml，用精制石棉過濾，貯存于具有橡皮塞的玻璃瓶?jī)?nèi)；
2.11　精制石棉：先用3N鹽酸將石棉浸泡2～3日后，用水洗凈。再加10％氫氧化鈉溶液浸泡2～3日，傾去溶液，用熱堿性酒石酸銅乙液浸泡數(shù)小時(shí),用水洗凈。再以3N鹽酸浸泡數(shù)小時(shí)，用水洗至不呈酸性，使之成為微細(xì)的軟纖維，用水浸泡貯存于玻璃瓶?jī)?nèi)，作填充古氏坩堝用。
3　操作方法
稱試樣2～5g，置于放有折疊濾紙的漏斗內(nèi)，先用乙醚50ml分5次洗除脂肪, 再用85％乙醇洗去可溶性糖類，將殘留物移入250ml燒杯內(nèi)，用水約50ml分幾次將濾紙上殘?jiān)慈霟校诺椒兴≈屑訜?5min，使淀粉糊化, 放冷至60℃，加淀粉酶溶液(或麥芽汁)20ml，維持55～60℃水解1h，經(jīng)常攪拌。然后取1滴加碘液1滴,如顯藍(lán)色,再加熱糊化,并加淀粉酶溶液(或麥芽汁)20ml，水解至碘液不呈藍(lán)色為止。加熱至沸騰，冷后移入250ml容量瓶中，并加水至刻度，混勻。過濾，棄去初濾液，取50ml注入100ml容量瓶中，加6N 鹽酸5ml，在68～70℃水浴中加熱15min，冷后加甲基紅指示液2滴，用20％氫氧化鈉溶液中和,加水至刻度,混勻,用以測(cè)定還原糖。同時(shí)取水50ml和同量的淀粉酶溶液(或麥芽汁)作試劑空白試驗(yàn)。
4　結(jié)果計(jì)算
淀粉干基含量按下列公式計(jì)算：
5000 × 0.9 (A' - B)
淀粉(干基%) = ────────────
W × V (100 - M)
式中：A'-- 轉(zhuǎn)化后測(cè)得的還原糖(以葡萄糖計(jì))重量，mg;
B -- 試劑空白相當(dāng)于還原糖(以葡萄糖計(jì))重量，mg;
V -- 轉(zhuǎn)化后稀釋為100ml，測(cè)定還原糖的體積，ml;
W -- 試樣重量，g;
M -- 試樣水分百分率，％；
0.9 -- 還原糖(以葡萄糖計(jì))換算為淀粉的因數(shù)。
雙試驗(yàn)結(jié)果允許差不超過平均值的1%,取平均值作為測(cè)定結(jié)果。測(cè)定結(jié)果取小數(shù)點(diǎn)后第一位。
注:
① 自制淀粉酶: 取已發(fā)芽的麥粒,放在25～35℃溫度下干燥,磨成粉末。每100g粉末加20％乙醇200ml，浸泡24h后,用細(xì)布?jí)赫ゲ⑦^濾, 加雙倍濾液量的乙醇進(jìn)行沉淀。沉 淀經(jīng)布氏漏斗抽濾后,再置乳缽中與乙醇一起研磨,再抽濾,沉淀用乙醇和乙醚洗滌,最后在硫酸干燥器中干燥后備用。
② 試樣含脂肪量很少時(shí)，可不用乙醚洗滌。
③ 在使用淀粉酶前,可用已知含量的淀粉糊溶液少許,加定量的淀粉酶溶液,置55～60℃水浴上加熱1h，用碘溶液觀察,經(jīng)水解后藍(lán)色是否減退或消失,以確定酶的活力及水解時(shí)所需用量。一般淀粉酶活力為1：25，1：50及1：100。