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糧食、油料檢驗 淀粉測定法

   2013-10-03 15060
核心提示:本標準適用于商品糧食、油料淀粉含量的測定。1 儀器和用具1.1 古氏坩堝:25ml;1.2 抽濾瓶:500ml;1.3 真空泵或水泵;1.4 滴
  本標準適用于商品糧食、油料淀粉含量的測定。
1 儀器和用具
1.1 古氏坩堝:25ml;
1.2 抽濾瓶:500ml;
1.3 真空泵或水泵;
1.4 滴定管:25ml;
1.5 錐形瓶:100ml、250ml、500ml;
1.6 移液管:20ml;
1.7 容量瓶:100ml、250ml、500ml;
1.8 回流冷凝管;
1.9 電爐;
1.10 燒瓶:150ml;
1.11 漏斗:6cm;
1.12 研缽、溫度計、顯微鏡等。
2 試劑
2.1 0.5%淀粉酶溶液或麥芽汁:取大麥粒加水濕潤浸泡12h,在搪瓷盤內平鋪約1cm厚,使其發芽數日。待幼芽長約1cm時,取發芽粒50g,磨碎,加水400ml,在常溫下浸漬3h,過濾備用(保存時加氯仿或甲苯數滴,防止生霉);
2.2 碘溶液:稱碘化鉀3.6g, 溶于20ml水中,加碘1.3g,溶解后再加水至100ml;
2.3 0.1N高錳酸鉀標準溶液;
2.4 1N氫氧化鈉溶液:取氫氧化鈉4g加水溶解至100ml;
2.5 硫酸鐵溶液:取硫酸鐵50g,加水200ml溶解后,饅慢加入硫酸100ml,冷后加水至1000ml;
2.6 3N鹽酸: 取鹽酸25ml,加水至100ml;
2.7 6N鹽酸:取鹽酸100ml,加水至200ml;
2.8 20%氫氧化鈉溶液;
2.9 甲基紅指示液:0.1%甲基紅乙醇溶液;
2.10 費林氏溶液:
2.10.1 堿性酒石酸銅甲液:取硫酸銅結晶34.69g,加適量水溶解,加硫酸0.5ml,再加水至500ml,用精制石棉過濾;
2.10.2 堿性酒石酸銅乙液:取酒石酸鉀鈉173g與氫氧化鈉50g,加適量水溶解,稀釋至500ml,用精制石棉過濾,貯存于具有橡皮塞的玻璃瓶內;
2.11 精制石棉:先用3N鹽酸將石棉浸泡2~3日后,用水洗凈。再加10%氫氧化鈉溶液浸泡2~3日,傾去溶液,用熱堿性酒石酸銅乙液浸泡數小時,用水洗凈。再以3N鹽酸浸泡數小時,用水洗至不呈酸性,使之成為微細的軟纖維,用水浸泡貯存于玻璃瓶內,作填充古氏坩堝用。
3 操作方法
稱試樣2~5g,置于放有折疊濾紙的漏斗內,先用乙醚50ml分5次洗除脂肪, 再用85%乙醇洗去可溶性糖類,將殘留物移入250ml燒杯內,用水約50ml分幾次將濾紙上殘渣洗入燒杯中,放到沸水浴中加熱15min,使淀粉糊化, 放冷至60℃,加淀粉酶溶液(或麥芽汁)20ml,維持55~60℃水解1h,經常攪拌。然后取1滴加碘液1滴,如顯藍色,再加熱糊化,并加淀粉酶溶液(或麥芽汁)20ml,水解至碘液不呈藍色為止。加熱至沸騰,冷后移入250ml容量瓶中,并加水至刻度,混勻。過濾,棄去初濾液,取50ml注入100ml容量瓶中,加6N 鹽酸5ml,在68~70℃水浴中加熱15min,冷后加甲基紅指示液2滴,用20%氫氧化鈉溶液中和,加水至刻度,混勻,用以測定還原糖。同時取水50ml和同量的淀粉酶溶液(或麥芽汁)作試劑空白試驗。
4 結果計算
淀粉干基含量按下列公式計算:
5000 × 0.9 (A' - B)
淀粉(干基%) = ────────────
W × V (100 - M)
式中:A'-- 轉化后測得的還原糖(以葡萄糖計)重量,mg;
B -- 試劑空白相當于還原糖(以葡萄糖計)重量,mg;
V -- 轉化后稀釋為100ml,測定還原糖的體積,ml;
W -- 試樣重量,g;
M -- 試樣水分百分率,%;
0.9 -- 還原糖(以葡萄糖計)換算為淀粉的因數。
雙試驗結果允許差不超過平均值的1%,取平均值作為測定結果。測定結果取小數點后第一位。
注:
① 自制淀粉酶: 取已發芽的麥粒,放在25~35℃溫度下干燥,磨成粉末。每100g粉末加20%乙醇200ml,浸泡24h后,用細布壓榨并過濾, 加雙倍濾液量的乙醇進行沉淀。沉 淀經布氏漏斗抽濾后,再置乳缽中與乙醇一起研磨,再抽濾,沉淀用乙醇和乙醚洗滌,最后在硫酸干燥器中干燥后備用。
② 試樣含脂肪量很少時,可不用乙醚洗滌。
③ 在使用淀粉酶前,可用已知含量的淀粉糊溶液少許,加定量的淀粉酶溶液,置55~60℃水浴上加熱1h,用碘溶液觀察,經水解后藍色是否減退或消失,以確定酶的活力及水解時所需用量。一般淀粉酶活力為1:25,1:50及1:100。
 
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